89Zr标记CAR-T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内分布研究
发表时间：2019-08-11
实验目的：
PET 分子影像方法具有活体显像、动态定量、自身对照、连续观察等突出优点。通过89Zr标记及小动物PET/CT技术，在活体条件下研究CAR-T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内分布特征。
实验方法：
小鼠异位移植瘤模型，分为2组，其中，实验组尾静脉单次注射89Zr-CAR-T细胞；对照组尾静脉单次注射89Zr-对照T细胞。并在给药后2 h、24 h、72 h和168 h进行小动物PET/CT扫描。扫描采集结束后，对PET图像进行分析，勾画感兴趣区域（Region of Interest，ROI），计算%ID/g值，分析89Zr-CAR-T和对照T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内主要脏器和肿瘤的分布情况。
实验结果：
标记质控：
89Zr-CAR-T细胞：比活度为0.6 µCi/10^6 cells，细胞活率为98%，放射性化学纯度为98%，满足实验需求。
89Zr-对照T细胞：比活度为0.7 µCi/10^6 cells，细胞活率为99%，放射性化学纯度为98%，满足实验需求。
89Zr-CAR-T细胞标记前后细胞杀伤力无显著性差异。
小动物PET/CT扫描实验：
静脉注射后，放射性物质主要分布于脾、肝和肺等脏器。给予89Zr-CAR-T后，肿瘤的放射性摄取逐渐增加，而给予89Zr-对照T细胞组的肿瘤放射性摄取值很低，与肌肉（本底）相当。从各时间点的靶本比（即肿瘤与肌肉放射性物质摄取值的比值）来看，给予89Zr-CAR-T细胞组的靶本比逐渐升高，在168 h时靶本比为35.86，而给予对照T细胞组的靶本比仅为0.99，表明89Zr-CAR-T对肿瘤细胞具有靶向性。
结论：
建立89Zr标记CAR-T细胞和对照T细胞的有效方法，并进行小动物PET/CT显像观察89Zr-CAR-T和89Zr-对照T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内的分布。研究表明，静脉注射后，放射性物质主要分布于脾、肝和肺等脏器。与对照组89Zr- T细胞相比， 89Zr-CAR-T细胞在肿瘤有明显的放射性物质摄取，表明89Zr-CAR-T细胞对肿瘤细胞具有靶向性。
PET 分子影像方法具有活体显像、动态定量、自身对照、连续观察等突出优点。通过89Zr标记及小动物PET/CT技术，在活体条件下研究CAR-T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内分布特征。
实验方法：
小鼠异位移植瘤模型，分为2组，其中，实验组尾静脉单次注射89Zr-CAR-T细胞；对照组尾静脉单次注射89Zr-对照T细胞。并在给药后2 h、24 h、72 h和168 h进行小动物PET/CT扫描。扫描采集结束后，对PET图像进行分析，勾画感兴趣区域（Region of Interest，ROI），计算%ID/g值，分析89Zr-CAR-T和对照T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内主要脏器和肿瘤的分布情况。
实验结果：
标记质控：
89Zr-CAR-T细胞：比活度为0.6 µCi/10^6 cells，细胞活率为98%，放射性化学纯度为98%，满足实验需求。
89Zr-对照T细胞：比活度为0.7 µCi/10^6 cells，细胞活率为99%，放射性化学纯度为98%，满足实验需求。
89Zr-CAR-T细胞标记前后细胞杀伤力无显著性差异。
小动物PET/CT扫描实验：
静脉注射后，放射性物质主要分布于脾、肝和肺等脏器。给予89Zr-CAR-T后，肿瘤的放射性摄取逐渐增加，而给予89Zr-对照T细胞组的肿瘤放射性摄取值很低，与肌肉（本底）相当。从各时间点的靶本比（即肿瘤与肌肉放射性物质摄取值的比值）来看，给予89Zr-CAR-T细胞组的靶本比逐渐升高，在168 h时靶本比为35.86，而给予对照T细胞组的靶本比仅为0.99，表明89Zr-CAR-T对肿瘤细胞具有靶向性。
结论：
建立89Zr标记CAR-T细胞和对照T细胞的有效方法，并进行小动物PET/CT显像观察89Zr-CAR-T和89Zr-对照T细胞在小鼠异位移植瘤模型体内的分布。研究表明，静脉注射后，放射性物质主要分布于脾、肝和肺等脏器。与对照组89Zr- T细胞相比， 89Zr-CAR-T细胞在肿瘤有明显的放射性物质摄取，表明89Zr-CAR-T细胞对肿瘤细胞具有靶向性。